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HPLC峰型不佳原因
  • 發(fā)布日期:2021-08-09      瀏覽次數(shù):3980
    •                                                                        HPLC峰型不佳原因

                                                                         檢碩科學上海有限公司

      1. 未出峰    可能的原因:

      a. 未成功進樣,或樣品未溶解進溶劑中,或樣品分解變質(zhì)或樣品濃度太低;

      b. 液相色譜儀器本身的問題:泵或者檢測器故障;

      c. 流動相選擇不合適,如對于反相硅膠柱來說,若流動相極性太大,是沖不下來一些小極性的物質(zhì)的,物質(zhì)一直保留在柱子中,因而不出峰;

      d. 檢測器不合適,如有些產(chǎn)品沒有紫外吸收或者吸收很弱,但是檢測還使用了UV檢測器;

      2.平頭峰     可能的原因:

      a. 樣品濃度過大或進樣體積太大,這個也是大多數(shù)原因;

      b. 液相色譜儀檢測器設置不正確;

      3.負峰     可能的原因:

      a. 流動相吸收本底值過高;

      b. 進樣過程中進入空氣;

      c. 樣品組分的吸收低于流動相;

      d. 配制樣品的溶劑與流動相不一致;

      4.肩峰     可能的原因:

      a. 進樣量過大,樣品濃度過高;

      b. 保護柱或色譜柱柱頭堵塞;

      c. 保護拄或色譜柱污染或失效;

      d. 色譜柱柱頭塌陷;

      5.裂峰     可能的原因:

      a. 溶劑效應:溶解樣品用的溶劑和起始流動相極性相差太大;

      b. 保護柱或色譜柱柱頭堵塞;

      c. 保護拄或色譜柱污染或失效;

      d. 色譜柱柱頭塌陷;

      6.鬼峰     可能的原因:

      鬼峰(ghost peak)是在某個譜圖里出現(xiàn),可能同樣的條件再做一次又不出現(xiàn)了,時有時無的峰。

      a. 進樣閥殘余峰,在每次進完樣后用充足的時間來平衡和清洗系統(tǒng);

      b. 樣品中存在未知物,改進樣品的預處理;

      c. 流動相污染,更換新流動相(或者換品牌);盡可能現(xiàn)配現(xiàn)用,隔夜的流動相再次使用時要過濾;

      d. 流路中有小的氣泡,打開Purge閥,加大流速排除;

      7. 前伸峰     可能的原因:

      a. 進樣量或樣品濃度高;

      b. 溶解樣品的溶劑比流動相極性強;

      c. 保護拄或色譜柱污染或失效;

      d. 流動相不合適,更換新流動相(調(diào)pH或換種類、比例等);

      8. 拖尾峰     可能的原因:

      a. 進樣量或樣品濃度高;

      b. 流動相不合適,更換新流動相(調(diào)pH或換種類、比例等);

      c. 硅羥基作用:加入三乙胺,用堿致鈍化柱增加緩沖液或鹽的濃度降低流動相pH值,鈍化樣品;

      d. 柱內(nèi)燒結(jié)不銹鋼失效:更換燒結(jié)不銹鋼,加在線過濾器,過濾樣品;

      e. 色譜柱柱頭塌陷或柱效下降:更換色譜柱;

                                                                                                                                           本篇轉(zhuǎn)載至實驗之家

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